①操作者應做好個人防護工作，在生物安全1～2級實驗室中工作的人員應穿外套式工作服;在3～4級實驗室工作的人員應穿手術衣式工作服，手術衣的手套應能包住腕關節，必要時應戴面罩和眼罩。②操作前應將本次操作的全部物品移入生物安全柜，避免雙臂頻繁穿過氣幕破壞氣流;柜內物品擺放應做到清潔區、半污染區與污染區基本分開，方便操作過程中取用物品，且三區之間無交叉，物品應盡量靠后放置，但不得擋住氣道口，以免干擾氣流正常流動。柜內不放與本次實驗無關的物品。③打開風機5～10min，待柜內空氣凈化、氣流穩定后方可操作。將雙臂緩緩伸入柜內，靜止一會兒，待柜內氣流穩定后按照從清潔區到污染區的順序輕柔、舒緩地操作，避免影響氣流和交叉污染。操作時不可打開玻璃視窗，面部應處在工作窗口之上，盡量減少背后人員走動和快速開關房門，嚴禁使用明火，以免干擾柜內氣流穩定，且明火也容易損壞HEPA濾器。④操作時為防液滴濺出，可在臺面鋪上用消毒劑浸泡過的毛巾或紗布，但不能覆蓋住生物安全柜格柵。處理溢出物時，不可將頭伸入生物安全柜內，面部不可直接對著前操作口，而應處于前視面板的后方。如果溢出量少，可直接用消毒劑浸濕紙巾擦拭;如溢出量大或容器破碎時，要求廣泛消毒，則先將柜內的所有物品表面進行消毒，再移出生物安全柜按操作規程消毒，選擇消毒劑時需考慮其對生物安全柜的腐蝕性，使用消毒液的作用時間應維持在20～30min。如果溢出物流入生物安全柜內部，則需要對其進行熏蒸。⑤當出現報警或系統失效時應停止使用，查明原因確保安全后再使用。當生物安全柜或實驗室出現持續正壓時，室內人員應立即停止操作并戴上防護面具，采取措施恢復負壓。如不能及時恢復和保持負壓，應停止實驗，及早按規程退出，并采取相應處理措施和通知相關人員.